7 - 氨基放线菌素 D(7-AAD,CAS:7240-37-1)核心用途
7-AAD 是一种膜不通透性、GC 偏好型 DNA 嵌入荧光染料,主打流式细胞术活 / 死细胞区分、凋亡检测与细胞周期分析,兼具弱抗菌与抗肿瘤活性,仅限科研使用。
一、核心科研用途(最常用)
1. 流式细胞术:活 / 死细胞与凋亡区分(主流)
- 活细胞:细胞膜完整,拒染(7-AAD 阴性)。
- 晚期凋亡 / 坏死细胞:膜破损,强染(7-AAD 亮)。
- 早期凋亡:膜轻度受损,弱染(7-AAD 暗)。
- 浓度:常规0.5–5 μg/mL(死细胞排除);凋亡区分10–20 μg/mL。
- 光谱:Ex/Em ≈ 549/648 nm(远红),与 FITC、PE 光谱无重叠,适合多色标记。
2. 细胞周期与 DNA 含量分析
- 固定透化后嵌入 DNA,GC 区高亲和,用于 G1/S/G2/M 期检测、染色体显带。
- 替代 PI,分辨率更高、背景更低。
3. 荧光显微镜:细胞核复染
- 固定样本核标记,与免疫荧光(IF)、免疫组化(IHC)联用,定位核蛋白。
二、生物活性(次要)
- RNA 聚合酶抑制剂:阻断转录,抑制细胞增殖。
- 抗菌:抗革兰氏阳性菌(如金黄色葡萄球菌)。
- 抗肿瘤(体外):抑制白血病、肉瘤细胞株生长(无临床应用)。
三、关键特性(选它的理由)
- 膜不通透:只染死 / 受损细胞,活细胞无染色。
- GC 特异性:优先结合 DNA 的 GC 富集区,AT 区不结合。
- 远红发射:647 nm,多色流式首选,减少光谱重叠。
- 稳定性:避光 2–8℃保存,水溶液现配现用。
四、应用场景速览
- ✅ 流式:活 / 死细胞分选、凋亡检测、细胞周期、免疫表型多色分析。
- ✅ 显微:细胞核复染、染色体结构观察、核蛋白共定位。
- ✅ 机制:转录抑制、DNA 结合动力学、细胞死亡通路研究。
五、安全提示
- 潜在致癌物,操作需戴手套、护目镜,避免皮肤 / 黏膜接触。
- 仅限科研,严禁临床或人体使用。