汇百试剂:ASB-14
ASB-14(CAS: 216667-08-2,氨基磺基甜菜碱-14)是一种中链两性离子去污剂,在生物化学与蛋白质组学中是高效增溶膜蛋白的核心试剂,尤其擅长解决传统去污剂难以处理的疏水蛋白问题。
一、核心用途:蛋白质增溶与提取(最主要应用) ASB-14的核心价值在于高效增溶膜蛋白及疏水蛋白,显著提升难溶蛋白的提取效率,优于经典的CHAPS。
1. 膜蛋白增溶(2D电泳首选):
作为两性离子去污剂,用于双向凝胶电泳(2D‑PAGE)的样品制备,增溶包括整合膜蛋白、膜周边蛋白在内的各类蛋白质。 可溶解传统去污剂(如Triton X‑100、CHAPS)难以增溶的高度疏水膜蛋白,显著增加2D胶上的蛋白点数量,尤其能检出此前无法观察到的膜蛋白。典型应用:人心肌、脑组织、红细胞膜、杜氏利什曼原虫、弗朗西斯菌等样本的蛋白质组学分析。
2. 蛋白质组学样品制备:
作为再水化缓冲液关键组分,用于细胞/组织总蛋白提取,适配尿素、硫脲等强变性体系,兼容DTT等还原剂。与CHAPS联用(如0.5% ASB‑14 + 4% CHAPS),在含硫脲的裂解液中协同增溶,是复杂样本(如脑组织)的最优组合之一。
3. 蛋白酶体与膜相关蛋白提取:
专门用于蛋白酶体复合物及膜相关蛋白的提取,保持蛋白复合物的完整性与活性。适用于从细胞器、膜组分中富集疏水蛋白,用于后续质谱鉴定与功能研究。
二、生物化学与分子生物学应用。
1. 蛋白质结构与功能研究:用于膜蛋白的纯化与复性,在非变性条件下维持膜蛋白的天然构象与活性,为结晶、酶活测定提供稳定样本。研究两性离子胶束的形成与特性,作为模型表面活性剂,探索胶束‑蛋白相互作用机制。
2. 组织工程与生物材料:用于异种支架材料的去抗原(AR)处理,通过温和增溶去除细胞表面抗原蛋白,降低免疫原性,用于组织工程支架制备。
3. 其他生化应用:作为温和去污剂用于细胞裂解,避免蛋白变性与聚集;用于脂质体、囊泡的制备与稳定性研究;适配质谱(MS)分析,低浓度下不干扰肽段离子化,适合膜蛋白的质谱鉴定。
三、作用特点与优势。
两性离子特性:净电荷为零,在宽pH范围稳定,不干扰等电聚焦(IEF),完美适配2D电泳流程。中链烷基(C14):兼顾增溶能力与蛋白兼容性,比短链去污剂(如CHAPS)增溶力更强,比长链去污剂更温和。 高水溶性:可溶于水至100 mM,易配制各类缓冲液。低干扰性:不与蛋白共价结合,透析或超滤可轻松去除,不影响后续酶活、结合实验。
四、典型应用配方示例(2D电泳裂解液)。
7 M 尿素 + 2 M 硫脲 + 4% CHAPS + 0.5% ASB‑14 + 1% DTT + 0.5% IPG缓冲液。此配方可显著提升膜蛋白检出率,是复杂样本蛋白质组学的标准方案。
总结:ASB‑14是膜蛋白研究的“黄金试剂”,核心解决疏水蛋白增溶难题,广泛用于蛋白质组学、结构生物学与组织工程领域。